Large-scale identification of calcium oxalate stone inhibitory proteins in normal human urine
发表日期：
2024年
发表期刊：
International Journal of Biological Macromolecules
摘要：
最近的证据表明，正常人尿液中的蛋白质可以抑制草酸钙（CaOx）肾结石的形成。在此，我们采用阴离子交换（DEAE）和体积排阻（Superdex 200）材料，通过快速蛋白液相色谱（FPLC）对正常人尿液蛋白进行分离。我们通过草酸钙结晶、生长、聚集和晶体-细胞粘附实验，对分离得到的组分（F1-F15）进行了检测。随后，对那些对草酸钙晶体具有强效抑制活性的组分进行了质谱蛋白质鉴定。
数据显示，15个组分中有13个在至少一种晶体实验中显示出抑制活性。综合草酸钙抑制评分表明，F6、F7和F8的抑制活性最强。通过纳升级液相色谱-电喷雾-四级杆-飞行时间串联质谱（NanoLC-ESI-Qq-TOF MS/MS）技术，我们分别在F6、F7和F8中鉴定出了105、93和53种蛋白质。
在这些蛋白质中，有60种存在于至少两个组分中，和/或被收录在StoneMod数据库（https://www.stonemod.org）中，具有确凿的实验证据，被认为是已知的抑制剂。有趣的是，这60种潜在抑制剂中，有10种据报道在草酸钙结石患者尿液中的水平低于健康（无结石）个体，这更进一步证实了它们作为有效的草酸钙结石抑制剂的作用。
我们的研究提供了一个潜在的草酸钙结石抑制蛋白的最大数据集，这将有助于进一步阐明结石形成机制，并最终用于治疗/预防应用。
笔记
健康人群的尿液中可能含有抑制结石形成的成分
收集了30例健康人群的尿液，混合，根据电荷和蛋白质大小分成15份，分别进行晶体成核、生长、聚集和粘附试验
结果发现F6,7,8里面的蛋白质成分抑制了结石形成，然后再进一步分析F6,7,8里面的详细的蛋白成分。
其中F6,7里面包括了OPN,因此，作者认为OPN是抑制结石形成的。